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生物工程

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论述环境因素对细胞生长及代谢的影响?

正确答案: (1)温度
一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或过低都会影响到细胞的生长。细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低。温度不低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用;把细胞置于25~35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减缓;放在40℃数小时后,再置回37℃培养细胞仍能继续生长。但如果在40℃下暴露时间太长,对细胞生长不利,甚至变圆脱落于瓶壁。
高温主要引起酶的灭活、类脂质破坏,核分裂的破坏,产生凝固酶使细胞发生凝固,另外使蛋白质变性。因此,体外培养细胞时一定要避免高温。
(2)pH:PH也会影响微生物的生长,但通常发酵都是在最适PH范围内或附近,对大多数微生物来说,可接受的PH范围可以使围绕最佳值变化1~2单位。在某些情况下,生长的最适PH与产物形成时的PH是不同的。哺乳动物细胞则对PH的变化非常敏感。发酵过程中
PH可以改变。这通常取决于基质的特性,尤其是其中的氮源,常用的氮源是氨,随着发酵的进行,氨被细胞利用,PH将下降。
(3)无毒和无菌
无毒和无菌是体外培养细胞的首要环境条件。细胞在活体内,偶尔有细菌或有害物质入侵,因体内有强大的解毒系统和免疫系统,可将其解毒或清除,而不易受损害。但在离体的环境中,失去了防御系统,一旦有害物质入侵或细菌污染,可导致细胞死亡,前功尽弃。
(4)细胞接种浓度(密度)
在体外培养细胞中,细胞接种数对细胞的生长有影响,适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。
(5)容器转动速度和悬浮搅动速度
当悬浮搅拌培养细胞时,搅拌速度既不能太快,也不能太慢。如太慢,细胞易结团、下沉和贴壁,不利于细胞在悬浮状态下增殖。如果太快,容易起泡沫,细胞易窒息致死,同时,强烈地搅动易使细胞因机械损伤而破裂。所以选择适宜的搅拌速度很重要。
答案解析:
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