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生物学

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设计试验方案,判断镰刀形贫血病是否由编码血红蛋白的基因突变引起。

正确答案:(1)镰刀形贫血症的细胞和正常血红蛋白的细胞分别利用基因表达分析技术,分离提取mRNA,反转录合成cDNA双链。特定限制性核酸内切酶分离转录产物中具有基因特异性的核苷酸序列并制成标签。将这些序列标签连接、克隆、测序后,进行基因的鉴定和表达频率分析。分析二者之间的表达差异,确定某一基因可能为引起此疾病的基因。
(2)利用基因敲除技术将此基因敲除并构建重组基因载体,用电穿孔、显微注射等方法把2种重组DNA载体(含该基因和不含该基因)导入胚胎干细胞纯系中,使外源DNA与胚胎干细胞基因组中相应部分发生同源重组,将重组载体中的DNA序列整合到内源基因组中得以表达。
(3)将含重组基因的胚胎干细胞分别移植到不同代孕母鼠体中,待子代出生后观察其子代是否患该病,进一步确定该基因是否能引起此病理现象。
答案解析:
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