在PCR反应中，为什么科学家常合成20个左右碱基的核苷酸片段作为引物，而不用更多或更少碱基的核苷酸片段？
正确答案:经验表明，引物设计的正确与否是关系PCR扩增成败的关键因素。引物太短，就有可能同非靶序列杂交，得到非预期的扩增产物。例如在人类基因组中克隆基因，如果用8核苷酸引物，那么平均每隔48＝65536个碱基就会有—个结合位点，在全长3×109个碱基的基因组午大约会有43000个可能的结合位点；而如果使用20个核苷酸的引物，它的预期频率是平均每隔420＝1.1×1012个碱基才会有一个结合位点，远超出人类基因组长度，可以获得单一的扩增产物。但如果引物过长，那么引物同模板DNA的杂交速率下降，导致在反应循环周期内无法完成同模板的完全杂交，从而降低了PCR反应的杂交率。
答案解析:有
微信扫一扫手机做题