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生物工程

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简述层析分离技术的分类。

正确答案: (1)依操作形式分(柱层析、纸层析、薄层层析等)或根据固定相基质的形式分类,层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。
①纸层析:是指以滤纸作为基质的层析。
②薄层层析:是将基质在玻璃或塑料等光滑表面铺成一薄层,在薄层上进行层析。
③柱层析:则是指将基质填装在管中形成柱形,在柱中进行层析。
纸层析和薄层层析主要适用于小分子物质的快速检测分析和少量分离制备,通常为一次性使用,而柱层析是常用的层析形式,适用于样品分析、分离。生物化学中常用的凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、高效液相色谱等都通常采用柱层析形式。
(2)依分离机理分(吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析、分配层析等)
①吸附层析:是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。
②分配层析:是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中,不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。
③凝胶过滤:层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相,根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。
④离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
⑤亲和层析:是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力(如酶和抑制剂、抗体和抗原、激素和受体等),将某种配体连接在载体上作为固定相,而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种层析技术。亲和层析是分离生物大分子最为有效的层析技术,具有很高分辨率。
(3)依流动相分(液相色谱、气相色谱等)根据流动相的形式分类,层析可以分为液相层析和气相层析。
①气相层析:是指流动相为气体的层析。
②液相层析:指流动相为液体的层析。
气相层析测定样品时需要气化、大大限制了其在生化领域的应用,主要用于氨基酸、核酸、糖类、脂肪酸等小分子的分析鉴定。而液相层析是生物领域最常用的层析形式,适于生物样品的分析、分离。
答案解析:
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