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医学高级专业技术资格答辩

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对RNA病毒(如丙型肝炎病毒等),怎样进行基因扩增?

正确答案:1.用反转录PCR技术进行RNA病毒的基因扩增。反转录PCR(RT-PCR)是以RNA为模板合成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。
2.丙型肝炎病毒的RNA在标本中水平较低,此时经30个循环的PCR扩增所产生的cDNA量可能仍较少,不能在用溴化乙锭染色显示条带,故需进行套式PCR或双PCR,进行第二个30个循环的PCR扩增,即可使PCR产物量达到溴化乙锭的检出量。
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